6/19 HPLC（高速液体クロマトグラフィー）入門と 使用時の留意点及びトラブルシューティング

元 株式会社東レリサーチセンター 
水野 保子 氏　【講師紹介】

【講師略歴】
（株）東レリサーチセンターでバイオ分野の分析を担当。糖分析・タンパク分析を30年間担当し、抗体医薬品などの糖タンパク質医薬品の分析を他の受託分析会社にさきがけて、申請資料の信頼性の基準対応で実施。

【主なご業務】
糖分析、タンパク分析、脂質などのHPLC及びMSによる分析。
抗体などの糖タンパク質医薬品の特性解析（申請試料の信頼性の基準対応やGMPで実施）。

【活動等】
日本生化学会、日本糖質学会、質量分析学会、LC懇談会、
International　Carbohydrate Synposiumなどで発表

１．HPLCの基礎
1.1.HPLCの原理
　1.1.1.クロマトグラフィーとは？
　1.1.2.HPLCとは？
1.2.装置構成
　1.2.1.送液部（移動相供給部、送液ポンプ、ミキサー）
　1.2.2.試料注入部（オートサンプラー、マニュアルインジェクター）
　1.2.3.分離部（カラム、カラムオーブン）
　1.2.4.検出器（紫外可視分光検出器、蛍光検出器、質量分析計など）
　1.2.5.データ処理装置
1.3.分離モード（HPLCカラム）
　1.3.1.充填剤基材の種類と特徴
　1.3.2.物質の極性
　1.3.3.分離モードの種類と特徴

２．HPLCのクロマトグラムの読み方と定性分析・定量分析
　2.1.保持係数、理論段数、分離度などのパラメーターについて
　2.2.定性分析・定量分析について

３．HPLC使用時の留意点とノウハウ
　3.1.移動相調製時の留意点
　3.2.試料溶液調製時の留意点
　3.3.分析カラムの選択方法と分離条件の検討について
　3.4.検出器の選択方法と使用時の留意点

４．医薬品開発・分析におけるHPLCの適用事例とHPLCに関する試験法について
　4.1.医薬品分析におけるHPLCの適用事例
　4.2.HPLCに関する局法の試験法について

５ . HPLC装置のメンテナンス(ISO、GMPで要求される点検など)
　5.1.定期点検
　5.2.使用時点検（送液ポンプ、オートサンプラー、検出器など）

6. HPLC分析において起こりやすいトラブル事例と解決方法
　6.1.ベースラインが安定しない
　6.2.ノイズの発生がみられる
　6.3.圧力が通常より上昇する又は減少する
　6.4.ピーク形状が異常になる
　6.5.ピークが検出されない
　6.6.ゴーストピークが出現する
　6.7.ピーク面積の再現性がない
　6.8.ピークの分離が不十分である
　6.9.保持時間の再現性がない

□　質疑応答　□

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